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beibei3372

金虫 (初入文坛)

[交流] 求助:质粒酶切割胶回收问题

质粒约14kb,酶切成12kb和2kb,想回收12kb的,用的是上海生工的试剂盒,说明书回收范围是40bp~40kb,可是回收后跑胶却没有条带……
期待各位高手的指点!!!

[ Last edited by 350784478 on 2009-9-19 at 12:52 ]
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yumo

新虫 (小有名气)


beibei3372(金币+1,VIP+0):谢了哈! 5-26 13:35
加大质粒浓度,还不行,换个试剂
9楼2009-05-25 22:13:35
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sky1111

木虫 (正式写手)


beibei3372(金币+1,VIP+0):谢了哈,我再多切一点收收看,胶上另一个样没有问题啊…… 5-26 13:28
酶切后的条带是否很淡?若很淡的话,回收到的浓度太低,将看不到条带。还有在这块胶上有点别的样品么?能确定胶没有问题么?
4楼2009-05-25 20:00:54
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biogefart

木虫 (著名写手)

换别的试剂盒试试


beibei3372(金币+1,VIP+0):谢啦!实验室就生工的和Axygen两种,Axygen的范围又只到10kb……唉 5-26 13:30
12kb的片段,对于一般的胶回收试剂盒来说,效率都是比较低的
闹太套
5楼2009-05-25 20:12:15
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★ ★ ★ ★
sxdxrhyy(金币+3,VIP+0):感谢 5-25 20:28
beibei3372(金币+2,VIP+0):非常感谢哈! 5-26 13:33
片段较长,注意整个操作要轻柔
还有就是洗脱液要加热
滴到膜上后孵育一段时间
还有就是用质量最稳定的QIAGEN的试剂盒
6楼2009-05-25 20:13:14
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