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xihanlianz

银虫 (正式写手)

[交流] 电泳图分析

这是我用CTAB法提取的植物基因组DNA,氯仿:异戊醇抽提了两次,请大家帮忙看看,Marker,0.5*TBE缓冲液,0.8%胶都是新的,电压100V,跑了一个小时。


为什么Marker会跑成这样?
有几条带能说明提取到DNA了,只要有亮带即使还在孔里就能说明有提取到DNA吗?

[ Last edited by xihanlianz on 2009-5-27 at 12:52 ]
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hnndpt

铁虫 (正式写手)


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你用什么方法提取的?DNA得率太低,所以带暗,DNA不纯,所以点样空亮,建议换种方法试下.去上清的时候可以将枪头前面剪掉一段,有大口径去吸取,会好一点
2楼2009-05-25 18:55:03
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green1538

铜虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
如果是核酸胶的话,电压是不是有点高,时间也有点长了吧
3楼2009-05-25 18:59:32
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695

木虫 (职业作家)

电压有点高,时间有点长
4楼2009-05-25 19:26:35
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xihanlianz

银虫 (正式写手)

我老师说设置电压可以更高一点啊。跑的时间长不是使Marker更条带更分开吗?
5楼2009-05-25 20:46:10
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大肥猫

银虫 (小有名气)


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电压低了  我们经常用的都130以上

Maker弥散了 后面的DNA也弥散状态
而且你提取的蛋白很多
感恩每一天的到来
6楼2009-05-25 21:06:14
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haoyou3003

新虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
有非特异性结合 建议加大电压 跑的时间就少了 扩散的少了
7楼2009-05-25 23:12:21
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松竹

金虫 (正式写手)

是胶的问题!
8楼2009-05-26 00:09:10
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Shengjing

铁虫 (初入文坛)


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我觉得这个胶有问题。建议重新配胶。你用的是TAE 还是TBE 呀? 溶液也从新配一下试试。
9楼2009-05-26 05:55:32
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lujun01

银虫 (小有名气)


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你的问题很多,1,MARKE上样太多.
2,胶的浓度要调整.
3,电压要加大,因为你的胶很宽
10楼2009-05-26 07:54:11
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