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xydlengyue

金虫 (正式写手)

[求助] 同源重组单交换 pcr验证一直只有一条带 已有1人参与

rt 最近在做奇异变形杆菌的基因敲除,但是单交换这一步做了5次 一直都只能跑出来一条带 有没有大神指导一下 都快抑郁了
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篮球与科研都很重要~
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xydlengyue

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by biosci at 2019-06-23 23:08:59
你用的载体不对吧

我用的pGM-T载体 但是双酶切之后的连接转化 序列长度都对着
篮球与科研都很重要~
3楼2019-06-24 15:43:54
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biosci

捐助贵宾 (职业作家)


2楼2019-06-23 23:08:59
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prthefu

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

想问一下,你前面的流程是怎么样的,我知道的同源重组,都是吧上下游同源臂和替换基因融合后连接到载体上,然后,转化细菌,再筛选就行
你在这里提到单交换PCR验证,只有一条带,是什么意思??
nothing is impossible in this world,if you have the will to win,you can achieve anything
5楼2019-08-06 15:58:13
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