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yelinlin

木虫 (著名写手)

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[交流] 细菌DNA的提取

在细菌DNA提取中，加氯仿异戊醇和酚氯仿异戊醇的作用都是除去蛋白么？

[ Last edited by 350784478 on 2009-8-17 at 17:19 ]

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1楼 2009-05-25 12:34:55

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三磷酸腺苷

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★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流

异戊醇主要是用于稳定有机相和水相的界面
酚-氯仿都是用于除去能够溶于有机溶剂的杂质（核酸水溶性）
SDS和酚都是蛋白的强烈变性剂，能够把蛋白抽走
但是酚和水有一定的互溶，所以加氯仿增加比重，离心时界面清晰
后面有一次单独加氯仿只是为了进一步除去杂质
其实换用一次酚-氯仿或者干脆不弄多一次也行
纯度和得率往往是一对矛盾，看你的实验需求