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yelinlin

木虫 (著名写手)

[交流] 细菌DNA的提取

在细菌DNA提取中,加氯仿异戊醇和酚氯仿异戊醇的作用都是除去蛋白么?

[ Last edited by 350784478 on 2009-8-17 at 17:19 ]
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)


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异戊醇主要是用于稳定有机相和水相的界面
酚-氯仿都是用于除去能够溶于有机溶剂的杂质(核酸水溶性)
SDS和酚都是蛋白的强烈变性剂,能够把蛋白抽走
但是酚和水有一定的互溶,所以加氯仿增加比重,离心时界面清晰
后面有一次单独加氯仿只是为了进一步除去杂质
其实换用一次酚-氯仿或者干脆不弄多一次也行
纯度和得率往往是一对矛盾,看你的实验需求
2楼2009-05-25 12:38:34
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amisking

荣誉版主 (文坛精英)

优秀区长优秀版主

是使蛋白质变性!
如果没有人帮助你,那么你就去帮助别人。
3楼2009-05-26 23:02:38
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rest_cjt

新虫 (初入文坛)


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引用回帖:
Originally posted by yelinlin at 2009-5-25 12:34:
在细菌DNA提取中,加氯仿异戊醇和酚氯仿异戊醇的作用都是除去蛋白么?

其实,有的时候要求不高时,酚氯仿可以跳过不加,影响也不大。
4楼2009-06-04 01:04:33
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