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Mayzw

新虫 (初入文坛)

[求助] 酵母双杂筛库问题

诱饵和文库菌杂交完涂DDO/X-a-gal/AbA的150mm的大板子,最后的菌液是10mlYPDA重悬杂交菌沉淀得到的,没有进行稀释,直接涂了60个大板每个180ul,三天多了没动静啊,有没有大佬做过,求指教还有希望长吗?

@biostar2009 @wizardfan @飞约疯人院 @youlinglyw 发自小木虫IOS客户端
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happygjx

木虫 (小有名气)

楼主,请问你做出来了吧, 我也是类似的问题。

另外,我用10mlYPDA重悬杂交菌后,涂了二缺的大板子,就很浓,背景一片灰,有的一片蓝,没法挑单克隆啊。是这个筛选策略有问题还是涂得问题啊?要稀释多少倍涂吗?
3楼2021-10-09 03:28:10
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小松鼠45

捐助贵宾 (正式写手)

得长五六天吧。而且AbA不好用,a-gal稍好点,氨基酸缺陷行最好用。

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2楼2019-06-23 13:53:48
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