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Shaynin

铁杆木虫 (小有名气)

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[求助] 转化DH5a后载体序列是否会丢失部分片段已有1人参与

请教大神们一个问题，我构建好的载体转化进DH5a之后，测序检测出目的基因片段，但是载体的两端缺失了，这是什么原因？我构建的载体2970bp，已经测了两次了，都是同样的结果，能检测出目的片段，但是载体两端各缺失120bp的序列，后来觉得是生工的测序方法问题，又把质粒转到19T上，让生工重新测序，还是同样的结果。难道载体在转化过程中会丢失两端的片段吗？载体两端是我的PCR引物所在的区域，如果载体两端缺失了，为什么我PCR能扩增出目的条带？做了很久了这个质粒，现在就是两端序列缺失，没办法完成工作。。。很迷。。。

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