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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 克隆连接后无果～ 求赐教…
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skynet999

新虫 (初入文坛)
已领完
克隆连接后无果～ 求赐教…
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EcoRI和BglII双酶切…大片段载体大概10kb，插入片段200bp左右，T4连接一直无果， 16度过夜后放4度半天，平板有些许克隆，但都不是重组产物，目测大部分都是载体片段……… 求大牛赐教 该肿么破 已经克隆了近俩月一直这个样 …… TT

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1楼2019-06-17 17:43:41
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HanLL0926

新虫 (正式写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2019-06-17 21:48:26
增加目的片段的量试一试，相应的降低质粒载体的量；换一种连接反应体系，比如TAKALA的有一种；

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17楼2019-06-17 18:06:10
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HanLL092615楼
2019-06-17 17:59   回复  
skynet999(金币+3): 谢谢参与
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