24小时热门版块排行榜    

查看: 2553  |  回复: 7

Newfish1

铁虫 (初入文坛)

[求助] 在大肠杆菌中异源表达酵母基因是否需要密码子优化 已有1人参与

如题,
1.酵母基因表达系统和大肠有差异,那么异源表达其基因是否需要优化
2.该基因5000bp左右,选择什么启动子比较合适
3.普遍来说,异源表达某基因还需要注意什么
感谢解答,千恩万谢!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
2楼2019-06-14 19:10:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biosci

捐助贵宾 (知名作家)


5000bp的蛋白基本就表达不出来了吗

发自小木虫Android客户端
3楼2019-06-14 23:59:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sannny

新虫 (正式写手)

★ ★ ★
西门吹雪170: 金币+3, 鼓励回帖交流 2019-06-15 22:29:06
鉴于序列太长,合成成本比较高,建议先扩增目的基因做表达,现在可以补充稀有密码子的表达菌挺多的。另外就像楼上说的,蛋白太大,可能表达有困难,但也不是额绝对的,总归要试试。做蛋白表达,千万不要预设立场,比如哪个启动子更好,要不要优化之类的。合理的做法是不同的启动子,不同的标签的表达系统同时做。而不言先做一个,不行,换下一个。不然时间成本是很高的。

发自小木虫Android客户端
4楼2019-06-15 08:02:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xinxiyuzhou

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2019-06-15 22:29:20
酵母本身也是表达系统,为什么要做异源表达呢?用酵母本身表达系统不是更好?5000 bp的蛋白太大了点,基因克隆本身可能就比较难,再加上表达,时间周期会比较长。祝福!
5楼2019-06-15 09:10:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Newfish1

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by sannny at 2019-06-15 08:02:05
鉴于序列太长,合成成本比较高,建议先扩增目的基因做表达,现在可以补充稀有密码子的表达菌挺多的。另外就像楼上说的,蛋白太大,可能表达有困难,但也不是额绝对的,总归要试试。做蛋白表达,千万不要预设立场,比 ...

感谢解答,另外可否讲一下补充稀有密码子表达是如何操作的

发自小木虫Android客户端
6楼2019-06-15 12:40:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Newfish1

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by xinxiyuzhou at 2019-06-15 09:10:56
酵母本身也是表达系统,为什么要做异源表达呢?用酵母本身表达系统不是更好?5000 bp的蛋白太大了点,基因克隆本身可能就比较难,再加上表达,时间周期会比较长。祝福!

异源表达是代谢工程的常用手段吧,一来可以让基因表达不受宿主控制,二来很大可能性降低反馈抑制

发自小木虫Android客户端
7楼2019-06-15 12:44:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sannny

新虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by Newfish1 at 2019-06-15 12:40:22
感谢解答,另外可否讲一下补充稀有密码子表达是如何操作的
...

比如BL21(DE3)codonplus   比如Rosetta gami  B


楼里有人说了啊,既然是酵母的蛋白,完全可以用毕赤酵母表达系统做啊。

发自小木虫Android客户端
8楼2019-06-15 15:08:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 Newfish1 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 今天放榜吗? +15 布布和一二 2026-08-19 16/800 2026-08-23 09:55 by 张春生
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +13 羊腰板 2026-08-21 13/650 2026-08-23 09:25 by lfy8008
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 5/250 2026-08-23 07:41 by OEbVnUOu01ol
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 10/500 2026-08-23 07:17 by OEbVnUOu01ol
[博后之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 DpSrDtM079iu 2026-08-22 5/250 2026-08-23 04:07 by OEbVnUOu01ol
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 6/300 2026-08-23 03:40 by OEbVnUOu01ol
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 QTy3jDtz1uLt 2026-08-21 11/550 2026-08-23 02:55 by OEbVnUOu01ol
[考博] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 DpSrDtM079iu 2026-08-22 3/150 2026-08-23 00:55 by OEbVnUOu01ol
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +3 zjuhero 2026-08-22 4/200 2026-08-22 20:02 by mycsru
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +24 yaoyewhu2008 2026-08-20 26/1300 2026-08-22 17:43 by kammury
[教师之家] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 4/200 2026-08-22 16:52 by sunzitan
[基金申请] 人气不行了 +8 fansofjerry 2026-08-21 8/400 2026-08-22 16:30 by zyqchem
[基金申请] 今日不放榜?网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +16 医学老男孩 2026-08-20 20/1000 2026-08-21 21:13 by Ldrop2023
[基金申请] 科研孤儿太难了 +17 我4大白菜 2026-08-20 18/900 2026-08-21 20:57 by zhangev
[基金申请] 看来今天不会放榜了? +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 让我中一个面上吧! +11 大萍1987 2026-08-20 13/650 2026-08-21 14:48 by 20120902066
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +7 angus9576 2026-08-17 12/600 2026-08-21 13:38 by weiyin
[论文投稿] 投稿咨询 +5 wwm09 2026-08-17 7/350 2026-08-21 10:11 by 期刊论文帮手
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +10 zju2000 2026-08-16 11/550 2026-08-20 20:02 by cl479861084
[基金申请] 明天放榜? +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
信息提示
请填处理意见