24小时热门版块排行榜    

查看: 1021  |  回复: 5

小木頭

新虫 (小有名气)

[求助] 基因验证克隆 急急急 已有1人参与

从本实验室三代库里找到了目的基因全长,不用克,只对他进行验证,问题1:验证的时候是选ORF还是CDS进行验证?2.验证用ncbi设引物的时候,引物要不要覆盖整个ORF或CDS?
自己选的ORF进行验证,但也有人用CDS进行验证。这是怎么回事?设引物设了两对,但没有覆盖整个ORF,不知道这样弄对不对?
送测的时候 我送的是pcr未纯化,也就是只看了看电泳条带是一条就送测了,有些人验证基因是阳性菌送测,请问这种情况该怎么选择?

发自小木虫IOS客户端
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

1272356152

新虫 (正式写手)

2楼2019-06-10 00:50:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

美亿美生物

捐助贵宾 (职业作家)

技术服务-实验代做


3楼2019-06-10 07:20:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Huobol

至尊木虫 (著名写手)

orf和cds区别是什么,cds是大于orf吗,比如包括非编码区序列?

发自小木虫Android客户端
让羽毛再飞一会儿
4楼2019-06-10 07:31:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xinxiyuzhou

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
一般验证CDS即可。别人做好的克隆,应该是测过序的,个人觉得可以直接拿来用的。你们实验室克隆过的,你可以小提质粒直接送测序就行了。如果你再做其他克隆,构建的质粒片段需要完全构建好再去测序,送PCR产物没有意义。
5楼2019-06-10 08:01:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Huobol

至尊木虫 (著名写手)

真核生物的cds不就是该序列的最长orf吗,只是cDNA是大于ORF或CDS的。

发自小木虫Android客户端
让羽毛再飞一会儿
6楼2019-06-12 23:09:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 小木頭 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 279分求调剂 一志愿211 +17 chaojifeixia 2026-03-19 19/950 2026-03-23 23:26 by 呆呆师姐
[考研] 291求调剂 +8 hhhhxn.. 2026-03-23 8/400 2026-03-23 23:15 by peike
[考研] 化学308分求调剂 +3 你好明天你好 2026-03-23 3/150 2026-03-23 20:11 by macy2011
[考研] 336化工调剂 +4 王大坦1 2026-03-23 5/250 2026-03-23 18:32 by allen-yin
[考研] 一志愿中国石油大学(华东) 本科齐鲁工业大学 +4 石能伟 2026-03-17 4/200 2026-03-23 17:51 by 17862566385
[考研] 上海电力大学材料防护与新材料重点实验室招收调剂研究生(材料、化学、电化学,环境) +3 我爱学电池 2026-03-23 3/150 2026-03-23 17:16 by AZMK
[考研] 316求调剂 +7 梁茜雯 2026-03-19 7/350 2026-03-23 16:21 by lingjue
[考研] 北科281学硕材料求调剂 +8 tcxiaoxx 2026-03-20 9/450 2026-03-23 12:16 by tcxiaoxx
[考研] 323求调剂 +6 洼小桶 2026-03-18 6/300 2026-03-23 00:29 by king123!
[考研] 317求调剂 +12 申子申申 2026-03-19 18/900 2026-03-22 22:23 by luoyongfeng
[考研] 08工科 320总分 求调剂 +11 梨花珞晚风 2026-03-17 11/550 2026-03-22 17:42 by luoyongfeng
[考研] 306求调剂 +5 来好运来来来 2026-03-22 5/250 2026-03-22 16:17 by BruceLiu320
[考研] 一志愿 西北大学 ,070300化学学硕,总分287,双非一本,求调剂。 +3 晨昏线与星海 2026-03-20 3/150 2026-03-22 16:00 by ColorlessPI
[考研] 一志愿深大,0703化学,总分302,求调剂 +4 七月-七七 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:20 by 学员8dgXkO
[考研] 299求调剂 +6 △小透明* 2026-03-17 6/300 2026-03-21 02:42 by JourneyLucky
[考研] 083200学硕321分一志愿暨南大学求调剂 +3 innocenceF 2026-03-17 3/150 2026-03-21 02:35 by JourneyLucky
[考研] 材料学硕297已过四六级求调剂推荐 +11 adaie 2026-03-19 11/550 2026-03-20 21:30 by laoshidan
[考研] 085410人工智能专硕317求调剂(0854都可以) +4 xbxudjdn 2026-03-18 4/200 2026-03-20 09:07 by 不168
[考研] 生物学调剂招人!!! +3 山海天岚 2026-03-17 4/200 2026-03-19 21:34 by 怎么释怀
[考研] 材料工程专硕调剂 +5 204818@lcx 2026-03-17 6/300 2026-03-18 22:55 by 204818@lcx
信息提示
请填处理意见