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禁虫 (小有名气)

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眺望爱

铜虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
??筛选出一条引物的退火温度是啥情况?这是谁教你的PCR操作?退火温度不是看引物那么点的,而是要看你要扩的基因片段的GC,GC越高,所要破开氢键的数量越多,退火温度也要越高。如果退火温度低了,会出现多带杂带,如果高了,会糊掉,你这八成是退火温度高了。一般GC62到50百分比的都可以用60度或者62度将0.2摄氏度来退火。

发自小木虫Android客户端
目标:生物的星辰大海!!!!
2楼2019-05-30 23:39:32
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xinxiyuzhou

至尊木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
退火温度是根据引物来定的,毕竟是引物结合模板的浓度。一般情况下,52-62度范围内都是可以的,温度越高,特异性越好。如果引物已经定了,你可以做降落PCR看是否有改观。然后不行的话,买最好的酶试试。
3楼2019-05-31 10:29:19
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