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双酶切问题
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PCR产物(1kb)与PMD18-T连接后转化,挑白班提取质粒,质粒大概2.5kb。用XhoⅠ、NdeⅠ双酶切,过夜,怎么切不开啊。各位帮我分析分析什么原因,谢谢了。 50μl酶切体系: XhoⅠ 1.5μl NdeⅠ 1.5μl 重组质粒 1μl 10×H Buffer 5μl 灭菌ddH2O 补足50μl 37℃过夜 |
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