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pharmyang

金虫 (正式写手)

[交流] 在腹水中制备的抗体,腹水是什么成分

从Abcam公司订的抗体,保存在液体中,说明书中说是腹水。
我用SDS-PAGE检测,除了150k那有一个抗体带外,50k作用有一个更浓的带,不知是什么蛋白?
问题:有人遇到过这个问题吗?
  腹水的成分是什么?

我跟公司联系,说抗体不好,给他们看我的sds-page图,他们给我寄了瓶新的,可是结果还是一样。
我以前在别的公司定过在腹水中的抗体,就没这个问题。
Fighting
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suifengpig

至尊木虫 (文坛精英)

猪猪家族之族长~~~

优秀版主

帮顶先!!
ㄗs:┏──────────┓╭╮│......努力學習......做一个有知识的流氓~~~~│╭╯┗──┰────┰──┛
2楼2009-05-21 22:04:09
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3楼2009-05-21 22:07:56
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fanchg

木虫 (著名写手)

腹水是局限性水肿的一种,是指过多的液体在腹腔内积聚。正常情况下,腹腔内有少量液体,约200ml,起润滑作用,当液体量超过200ml时即可称为腹水
4楼2009-05-21 22:14:16
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wufengjian

木虫 (正式写手)

★ ★ ★
pharmyang(金币+3,VIP+0):thanks 5-22 01:17
楼主用SDS-PAGE电泳检测腹水能够检测到150KD的带?是不是没有加够巯基乙醇等还原剂的缘故啊?一般用SDS-PAGE检测抗体应该只有50KD(重链)和25KD(轻链)两条带。如果有50kd的带是正常的,有150KD反而觉得是二硫键没有完全打开,变性不充分的原因。另外,不知楼主用的是多少的胶,把胶的浓度放大,如12%,你应该还可以看到25KD的带。腹水中虽然有些杂蛋白,但是总的来说抗体还是占绝大部分的。
祝你好运。

[ Last edited by wufengjian on 2009-5-21 at 22:54 ]
5楼2009-05-21 22:52:14
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pharmyang

金虫 (正式写手)

谢谢各位的热心帮忙。
回复5楼的:
非还原和还原条件我都用了,我用的是8%的胶,根据Marker,25K的带应该还在胶上,可是我从来没检测出来25K的轻链。

在非还原条件下,有150K的带,但更多的是50K的带,没有25K的带。
在还原条件下,还是有50K的带,但没有25K的带。

请问:非还原条件下抗体巯基双键还没被还原呢,为什么会有50K的带?

谢谢先。
Fighting
6楼2009-05-22 01:11:45
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ytflark

木虫 (著名写手)

帮你顶下!
11
7楼2009-05-22 07:34:37
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