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pharmyang金虫 (正式写手)
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[交流]
在腹水中制备的抗体，腹水是什么成分
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从Abcam公司订的抗体，保存在液体中，说明书中说是腹水。 我用SDS-PAGE检测，除了150k那有一个抗体带外，50k作用有一个更浓的带，不知是什么蛋白？ 问题：有人遇到过这个问题吗？ 腹水的成分是什么？ 我跟公司联系，说抗体不好，给他们看我的sds-page图，他们给我寄了瓶新的，可是结果还是一样。 我以前在别的公司定过在腹水中的抗体，就没这个问题。 |
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3楼2009-05-21 22:07:56
fanchg
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4楼2009-05-21 22:14:16
wufengjian
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pharmyang(金币+3,VIP+0):thanks 5-22 01:17
pharmyang(金币+3,VIP+0):thanks 5-22 01:17
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楼主用SDS-PAGE电泳检测腹水能够检测到150KD的带？是不是没有加够巯基乙醇等还原剂的缘故啊？一般用SDS-PAGE检测抗体应该只有50KD（重链）和25KD（轻链）两条带。如果有50kd的带是正常的，有150KD反而觉得是二硫键没有完全打开，变性不充分的原因。另外，不知楼主用的是多少的胶，把胶的浓度放大，如12%，你应该还可以看到25KD的带。腹水中虽然有些杂蛋白，但是总的来说抗体还是占绝大部分的。 祝你好运。 [ Last edited by wufengjian on 2009-5-21 at 22:54 ] |
5楼2009-05-21 22:52:14
pharmyang
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6楼2009-05-22 01:11:45