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yuweibest

木虫 (正式写手)

[交流] SDS-PAGE之前,如何处理得粗酶液

做重组菌,需要将表达的蛋白进行SDS-PAGE,电泳结果总是找不到目的条带,怀疑是电泳前得粗酶液的方法有问题,现求助上样5*BUFF和双蒸水各加多少?以及水浴煮沸10分钟之后多少转离心?或者还有什么其他方法可供使用?感谢回答!
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DLLB

金虫 (小有名气)

★ ★
sxdxrhyy(金币+2,VIP+0):欢迎常来参与讨论! 5-21 20:37
我们实验室是这样做的,如果是菌液煮沸10分钟直接上样的话,在OD为2时,加80微升水20微升5Xbuffer,上样5微升,按OD值大小做比例调整。如果上粗酶液的话,要保证目的蛋白达到微克级才能检测到。
2楼2009-05-21 16:20:51
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