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smjzzz

铜虫 (小有名气)

[求助] PCR退火温度求助 已有1人参与

Tm值98摄氏度,GC含量65%,请问退火温度要多少合适?
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snoopyzxx

木虫 (著名写手)

VX:19192310212;公众号:生物技术与IVD
2楼2019-05-15 12:59:36
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hesu1105

木虫 (正式写手)

相信我最后一定能成功
3楼2019-05-15 13:09:09
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smjzzz

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by snoopyzxx at 2019-05-15 12:59:36
为什么这么高?

做的PCR-Targeting,设计的长引物。
4楼2019-05-15 15:36:17
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smjzzz

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by hesu1105 at 2019-05-15 13:09:09
想知道你这98度怎么来的

做的PCR-Targeting,设计的长引物。
5楼2019-05-15 15:36:27
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狗狗狗尾巴草

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
直接两步PCR,72度退火。我之前tm80的这样做出来过,你可以试试。祝你好运
6楼2019-05-15 21:05:03
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smjzzz

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 狗狗狗尾巴草 at 2019-05-15 21:05:03
直接两步PCR,72度退火。我之前tm80的这样做出来过,你可以试试。祝你好运

那你72度退火时间是多少呢
7楼2019-05-17 15:44:03
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