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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » pNPP为底物 酶活检测
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胖成海hhhh

新虫 (初入文坛)

[求助] pNPP为底物 酶活检测

请教各位一些基础的问题，谢谢！
我纯化的丝苏氨酸磷酸酶, 以pNPP为底物检测酶活，由于蛋白是 锰镁离子依赖，所以酶活检测buffer里含有10mM MnCl2，但是 酶活反应最后会有白色沉淀产生， 有没有人遇到这种情况？ 是不是因为pNPP反应产生磷酸根 与锰 产生的沉淀？
但是别人文献都是这么做的 我也不知道别人有没有这种情况。有没有人可以解答一下呢？

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1楼 2019-05-14 19:17:08
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胖成海hhhh

新虫 (初入文坛)
PBS加锰离子溶液 也会沉淀 ， 原理一样吗？ 有没有人做过这方面的实验呢？

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2楼2019-05-15 10:11:16
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木吉吉

新虫 (正式写手)
请问你实验进行的顺利吗？我近期也在测，买的sigma的试剂，直接用水溶了，一直没做出来，看有的帖子好像不是用水溶的，懵了

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3楼2019-05-16 06:35:15
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胖成海hhhh

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 木吉吉 at 2019-05-16 06:35:15
请问你实验进行的顺利吗？我近期也在测，买的sigma的试剂，直接用水溶了，一直没做出来，看有的帖子好像不是用水溶的，懵了

我是水溶的 微黄色

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4楼2019-05-16 10:15:35
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