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birdlivy

木虫 (正式写手)

[交流] RNA使用问题请教

最近我定了一段RNA序列,但是突然想到一个问题不知道如何解决。RNA本身很容易被水解,那我用的时候应该怎么做才能防止它被水解呢?配溶液时有没有什么专用的Buffer之类的呢?
还有一个问题就是我看到一般文献上做RNA干扰的时候都是用的双链RNA,这是为什么呢?

[ Last edited by 350784478 on 2009-8-17 at 17:28 ]
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

用RNase free的配,例如DEPC水
直接转单链容易降解
双链不容易
而且经过内源性加工,生物活性高
2楼2009-05-20 15:12:08
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birdlivy

木虫 (正式写手)

那转单链效果会不会是一样的?
在体内的话到底是单链还是双链起作用呢?
3楼2009-05-20 15:27:35
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

不一样,单链稳定性很差,所以会被降解
体内RISC会找到短的双链RNA并整合其中一链进去,成为成熟的干扰RNA复合体
起作用的是单链
4楼2009-05-20 15:46:19
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birdlivy

木虫 (正式写手)

谢谢哦!那双链RNA是体外先把单链杂交之后再转入细胞是吧?
5楼2009-05-20 16:38:43
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

嗯,化学合成单链,退火
6楼2009-05-20 16:42:57
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birdlivy

木虫 (正式写手)

谢谢哦!
7楼2009-05-20 16:45:15
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