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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » RNA使用问题请教
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birdlivy

木虫 (正式写手)

[交流] RNA使用问题请教

最近我定了一段RNA序列，但是突然想到一个问题不知道如何解决。RNA本身很容易被水解，那我用的时候应该怎么做才能防止它被水解呢？配溶液时有没有什么专用的Buffer之类的呢？
还有一个问题就是我看到一般文献上做RNA干扰的时候都是用的双链RNA，这是为什么呢？

[ Last edited by 350784478 on 2009-8-17 at 17:28 ]
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1楼 2009-05-20 15:07:27
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
用RNase free的配，例如DEPC水
直接转单链容易降解
双链不容易
而且经过内源性加工，生物活性高
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2楼2009-05-20 15:12:08
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birdlivy

木虫 (正式写手)
那转单链效果会不会是一样的？
在体内的话到底是单链还是双链起作用呢？
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3楼2009-05-20 15:27:35
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
不一样，单链稳定性很差，所以会被降解
体内RISC会找到短的双链RNA并整合其中一链进去，成为成熟的干扰RNA复合体
起作用的是单链
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4楼2009-05-20 15:46:19
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birdlivy

木虫 (正式写手)
谢谢哦！那双链RNA是体外先把单链杂交之后再转入细胞是吧？
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5楼2009-05-20 16:38:43
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
嗯，化学合成单链，退火
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6楼2009-05-20 16:42:57
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birdlivy

木虫 (正式写手)
谢谢哦！
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7楼2009-05-20 16:45:15
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