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短片段和平末端载体连接
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我要将我的80bp的回文序列插入到SnabI单酶切的平末端载体上。我是公司合成的80nt的寡核苷酸，自己95℃退火5分钟之后自然冷却至室温形成双链，然后用磷酸激酶处理。将空载单酶切回收后用碱性磷酸酶处理。之后将80bp回文序列和空载10℃连接1小时做转化。可是没有阳性菌落，长出来的全都是空载。想请问各位大佬怎么办啊？？ 发自小木虫Android客户端 |
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