24小时热门版块排行榜    

查看: 1519  |  回复: 10
【悬赏金币】回答本帖问题,作者嗯嗯,是的将赠送您 30 个金币
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

嗯嗯,是的

新虫 (小有名气)

[求助] 蛋白诱导之前有活性,但是纯化不下来,现在诱导不出活性蛋白了已有1人参与

之前诱导出了一点活性蛋白,跑了蛋白胶检测过,然后尝试进行纯化,有时候能挂上柱有时候不能,偶尔能挂上镍柱使用蛋白纯化仪纯化能纯下来的量也很少。目前处于诱导不出活性蛋白的阶段,求助一下有什么好的建议,我已经用了16℃诱导,iptg浓度最低降到了0.025,诱导时间21和23h都用过,之前16℃,0.1iptg浓度,诱导23h出现过少量活性蛋白但是纯化效果不理想。

蛋白诱导之前有活性,但是纯化不下来,现在诱导不出活性蛋白了


@biostar2009 发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

snoopyzxx

木虫 (著名写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 嗯嗯,是的 at 2019-05-11 22:55:11
您说的是16℃诱导4个小时是吗?
...

12都可以。多试试。

发自小木虫Android客户端
生物资源交流QQ群:1044518333
8楼2019-05-11 23:01:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

hyyyver

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可以考虑先37℃,1mM IPTG 诱导检测一下有没有表达,同时做一个WB,检测是否有His 标签。
2楼2019-05-06 15:36:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

许苏南

禁虫 (初入文坛)

本帖内容被屏蔽

3楼2019-05-06 16:32:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

snoopyzxx

木虫 (著名写手)

诱导时间可以降到4小时。

发自小木虫Android客户端
生物资源交流QQ群:1044518333
4楼2019-05-06 17:34:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
不应助 确定回帖应助 (注意:应助才可能被奖励,但不允许灌水,必须填写15个字符以上)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 盲审 +5 暮色恋伊人 2024-05-07 5/250 2024-05-08 00:00 by pinyangren
[考研] 关于要不要三战 +11 煎饼果子007 2024-05-06 15/750 2024-05-07 22:24 by GWZB
[硕博家园] 大家能不能给点意见啊 +17 是小蚂蚁啦 2024-05-01 30/1500 2024-05-07 20:50 by 匠人亦凡
[教师之家] 领导好安排自己做杂事。在成果上给领导挂名,请其不要经常安排自己做杂事 +8 河西夜郎 2024-05-03 8/400 2024-05-07 19:08 by zqwcr
[教师之家] 校级优秀本科毕业论文,比例多少?看指导教师资历吗? +7 河西夜郎 2024-05-04 11/550 2024-05-07 16:52 by chemhua
[教师之家] 请教下各位,南京航空航天大学天目湖校区如何? +3 pp爱写论文 2024-05-05 5/250 2024-05-07 16:48 by 似水流年Youth
[考博] 24-25申博 +4 muscling 2024-05-06 8/400 2024-05-07 15:34 by 愿你快乐啊
[论文投稿] 林学有投过总环的朋友吗? 50+4 New…… 2024-05-04 5/250 2024-05-07 15:10 by aoei
[教师之家] 双非本科,学生又懒又笨。双一流本科好一些?入职门槛和考核要求比双非本科高多少? +5 河西夜郎 2024-05-05 5/250 2024-05-07 14:04 by 15512189958
[基金申请] 祈福今年优青或者QB能有个好消息 66+3 5011fudan 2024-05-04 13/650 2024-05-07 13:06 by Kyokio
[有机交流] 长烷基链氰基水解成羧酸 求助 5+4 Sheerio 2024-05-05 10/500 2024-05-07 12:06 by Sheerio
[论文投稿] 请问如何进行查重? 6+5 fc5878 2024-05-06 6/300 2024-05-07 11:58 by 柏舟0000
[硕博家园] 找工作千万不能来差学校 +12 YN完蛋 2024-05-02 14/700 2024-05-07 11:40 by 459582015
[有机交流] 液晶单体纯度为什么要求这么高。 +4 Jonessnow 2024-05-01 5/250 2024-05-07 10:47 by kangshisan
[高分子] 求推荐研究U V热熔胶的高手 +4 千年一虫 2024-05-04 4/200 2024-05-07 09:16 by Sunrisepay
[论文投稿] 想请问下IEEE Trans最后一轮,你们等了多久? +4 DD4Dr 2024-05-03 9/450 2024-05-06 23:19 by topedit
[硕博家园] 等盲审 +10 暮色恋伊人 2024-05-03 18/900 2024-05-06 11:44 by 暮色恋伊人
[考博] 求博导收留 +4 黑森林nono派 2024-05-06 4/200 2024-05-06 08:02 by 安塔瓦拉多
[基金申请] 活页超过7000字,有影响吗? +4 青竹82 2024-05-04 5/250 2024-05-04 23:28 by 华氏911.
[论文投稿] 第一篇论文终于进去审稿状态了 +5 lizhengke06 2024-05-01 8/400 2024-05-03 09:14 by nono2009
信息提示
请填处理意见