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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 今天提的叶子的RNA，大侠看看
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再见苏摩

银虫 (初入文坛)

[交流] 今天提的叶子的RNA，大侠看看

感觉降解比较厉害，想顺便问下，28S 18S 5S 在DNAmarker相对应的什么地方
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1楼 2009-05-19 15:05:04
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再见苏摩

银虫 (初入文坛)
标记写错了，最上面的marker是5000bp
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2楼2009-05-19 15:38:49
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★
再见苏摩(金币+2,VIP+0):谢谢 5-20 09:06
动物的一般是4.5和1.9kb
植物的偏小，但具体就不知道在哪里
这种质量的RNA，做普通RT-PCR还是可以的
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3楼2009-05-19 16:33:17
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cofe

金虫 (小有名气)
已经不错了，稍微一点点拖尾。叶片RNA由于含叶绿体，所以28S下面应该是3条带，不包括5.8S的带。
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4楼2009-05-19 17:43:59
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jiaminl

铁杆木虫 (知名作家)
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Nevergiveup!
5楼2009-05-19 19:12:55
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112976553

金虫 (小有名气)
友情顶贴。逆转录试剂盒LZ用哪个？能否告知下
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6楼2009-05-19 20:31:24
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再见苏摩

银虫 (初入文坛)
问题是这个RNA我是准备用来做AFLP的......

我后续没有用试剂盒了，用SMART的方法，但引物和试剂都是自己准备的
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7楼2009-05-20 09:10:19
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zl2581

银虫 (小有名气)
没有降解，只是杂质多了些。
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8楼2009-05-20 09:27:39
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amilie030312

金虫 (正式写手)
可以在抽提RNA之前先去除一下植物的杂质，比如说去除多糖多胺等等，再来抽提植物的RNA就可以了，其实植物的RNA抽提出去了杂质以后抽提操作还是要比动物组织好提的。
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9楼2009-05-20 10:11:05
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bbyu007

木虫 (正式写手)
你的smear太强大了。。。貌似是降解得很厉害或者多糖去除的很不干净，还是好好处理枪头离心管等等吧，我经常提取叶片RNA，好的时候会提出5条带：28s、18s、16s（叶绿体和线粒体RNA）、5.8s，而且28s很亮，是18s亮度的1.5-2倍。继续提吧，我的绝密技巧是：加Trizol后65℃温浴5min，效果那是刚刚的~~~~~~

[ Last edited by bbyu007 on 2009-5-20 at 10:25 ]
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我是笨笨鱼~~~
10楼2009-05-20 10:15:16
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