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再见苏摩

银虫 (初入文坛)

[交流] 今天提的叶子的RNA,大侠看看

感觉降解比较厉害,想顺便问下,28S 18S 5S 在DNAmarker相对应的什么地方
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再见苏摩

银虫 (初入文坛)

标记写错了,最上面的marker是5000bp
2楼2009-05-19 15:38:49
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★
再见苏摩(金币+2,VIP+0):谢谢 5-20 09:06
动物的一般是4.5和1.9kb
植物的偏小,但具体就不知道在哪里
这种质量的RNA,做普通RT-PCR还是可以的
3楼2009-05-19 16:33:17
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cofe

金虫 (小有名气)

已经不错了,稍微一点点拖尾。叶片RNA由于含叶绿体,所以28S下面应该是3条带,不包括5.8S的带。
4楼2009-05-19 17:43:59
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jiaminl

铁杆木虫 (知名作家)

友情支持
Nevergiveup!
5楼2009-05-19 19:12:55
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112976553

金虫 (小有名气)

友情顶贴。逆转录试剂盒LZ用哪个?能否告知下
6楼2009-05-19 20:31:24
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再见苏摩

银虫 (初入文坛)

问题是这个RNA我是准备用来做AFLP的......

我后续没有用试剂盒了,用SMART的方法,但引物和试剂都是自己准备的
7楼2009-05-20 09:10:19
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zl2581

银虫 (小有名气)

没有降解,只是杂质多了些。
8楼2009-05-20 09:27:39
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amilie030312

金虫 (正式写手)

可以在抽提RNA之前先去除一下植物的杂质,比如说去除多糖多胺等等,再来抽提植物的RNA就可以了,其实植物的RNA抽提出去了杂质以后抽提操作还是要比动物组织好提的。
9楼2009-05-20 10:11:05
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bbyu007

木虫 (正式写手)

你的smear太强大了。。。貌似是降解得很厉害或者多糖去除的很不干净,还是好好处理枪头离心管等等吧,我经常提取叶片RNA,好的时候会提出5条带:28s、18s、16s(叶绿体和线粒体RNA)、5.8s,而且28s很亮,是18s亮度的1.5-2倍。继续提吧,我的绝密技巧是:加Trizol后65℃温浴5min,效果那是刚刚的~~~~~~

[ Last edited by bbyu007 on 2009-5-20 at 10:25 ]
我是笨笨鱼~~~
10楼2009-05-20 10:15:16
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