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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 质粒大提，除蛋白离心后上清还是很浑浊，过柱子堵塞
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danjianbaoz

铁虫 (初入文坛)

[求助] 质粒大提，除蛋白离心后上清还是很浑浊，过柱子堵塞 已有2人参与

大提质粒后加入NEU-buffer离心后只有少量蛋白沉淀，上清还是很浑浊，之后过柱子一直堵塞，质粒提取效率很低。
怀疑是菌过多，第二次提的时候多加了一倍的RES-buffer和LYS-buffer裂解，但是结果还是一样
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1楼 2019-04-29 21:40:25
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一个不小心就

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

换不用离心的大提kit吧
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5楼2019-05-03 22:44:52
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junjieshao

禁虫 (小有名气)
感谢参与，应助指数 +1
本帖内容被屏蔽
2楼2019-04-29 22:39:45
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danjianbaoz

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by junjieshao at 2019-04-29 22:39:45
123液后是高速离心吗？加二液后混匀充分了吗？时间有3分钟吗？

混匀了，8000rpm5min还是混浊

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3楼2019-04-30 17:41:47
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小松鼠45

捐助贵宾 (正式写手)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2019-04-30 23:34:48
转速越高越好，怎么也得有1200 g.我们都14000 g.时间推荐15 min

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4楼2019-04-30 20:40:05
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