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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 细胞rna提取
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别踩我的菜

新虫 (小有名气)

[交流] 细胞rna提取

病毒诱导细胞凋亡后，要做凋亡基因的表达，想请教在提取细胞RNA时是直接加Trizol，还是要倒掉细胞液后再加Trizol呢？倒掉细胞液的话，那漂浮的凋亡细胞不是也被弃掉了，不会影响提取的RNA的量吗？
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1楼 2019-04-23 17:22:16
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cxkhhh

新虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小冀-: 金币-10, 屏蔽内容, 违规存档, 禁止边缘性广告，已有多条违规记录，请不要出现商品推销信息或联系方式 2019-04-25 17:23:25
本帖内容被屏蔽
3楼2019-04-24 17:10:27
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你是路人甲

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
如果是冷冻的需要完全解冻之后再加Trizol，通常Trizol和血清的比例是1:1，也可以稍多加一些Trizol，少加些血。混匀之后放置10分钟左右，直接加三氯甲烷混匀再去离心，可以不用先离心去沉淀之后再加三氯甲烷。我们实验室用BIOG CFRNA EASY KIT离心技术提取RNA比Trizol要简便些,楼主需要注意如果用Trizol每个步骤操作要快，用的时间药短些，防止RNA降解,异丙醇沉淀的时候，放-20°C的冰箱半个小时，或再适当延长一点时间。迅速离心，之后加75%乙醇。只洗一遍，洗2遍易损失部分RNA。不要过分干燥，管内稍有点残余的乙醇也没关系。干燥一会就迅速加DEPC水少量。提取RNA之后迅速反转录成cDNA再保存。
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8楼2019-10-09 11:30:09
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tzynew2楼
2019-04-24 00:09   回复  
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2
nono20094楼
2019-04-24 20:24   回复  
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·
miaojiabing5楼
2019-04-25 13:13   回复  
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Biotage6楼
2019-04-25 16:20   回复  
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sz_kebaoyuan7楼
2019-04-25 16:32   回复  
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