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ljf2608金虫 (正式写手)
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[交流]
【求助】双缩脲法测定多肽含量的酸碱性调节问题
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刚刚解决了标曲的问题，又遇到了困难，希望虫虫们伸出援助之手： 在测多肽的时候，首先用三氯乙酸与待测液以1：1的比例混合，将其中的蛋白质沉淀，然后加入双缩脲试剂，但是双缩脲反应要求在碱性条件下才能显示，想请教一下虫子们：除了直接调pH值以外， 还有什么好方法？并且我的浓度比较低，即使冷冻干燥之提高浓度，还是需要调pH值。看了一篇文献，他是测蛋白质呢，是用三氯乙酸沉淀之后，测定沉淀中蛋白质的含量，他是先将沉淀用乙醇洗，再加入四氯化碳，不知道四氯化碳起到了什么作用，希望虫虫们帮帮我。 [ Last edited by sugl on 2009-5-19 at 08:34 ] |
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双缩脲试剂本身就可以配成碱性，提供碱性条件： 双缩脲的配制：1.50gCuSO4•5H2O，6g四水合酒石酸钾钠，用500mL蒸馏水溶解，在搅拌的情况下加入300mL 10%的NaOH，定容到1000mL（加入1g KI防止Cu2+自动还原生成Cu+），贮存于塑料瓶中，避光保存。 |
2楼2009-05-18 18:29:01
ljf2608
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3楼2009-05-18 22:25:29
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ljf2608
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