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相忘于江湖

新虫 (初入文坛)

[交流] PCR的空白电泳跑出了条带

请大家帮帮忙,PCR产物跑电泳的时候做的空白对照(就是没有加模版的,其他PCR所需试剂都加了的)总是跑出条带,我觉得是试剂污染,最后做试剂交叉试验,找出了是一种试剂污染了,最后换了新的,可是再做的时候还是有条带,我只好又只对空白PCR,跑电泳,结果没有条带,那说明新换的试剂没有污染,可是空白跟其样品一起做的时候又跑出了条带,但跟样品条带不在一个位置,请各位高手帮帮忙,到底是怎么回事啊,很着急,谢谢了!
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yoyocan

金虫 (正式写手)

你用的是不是 某些公司送的上样缓冲液的? 可能是那个东西 坏掉了
2楼2009-05-18 13:39:58
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lifefamily

呵呵~~
换水,换loading buffer
3楼2009-05-18 17:06:21
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juke9910

铜虫 (初入文坛)

可能是胶有问题,也有可能跟操作相关吧
4楼2009-05-18 17:24:38
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sunyi394

银虫 (小有名气)

呀,重大科研突破啊,快投稿nature
5楼2009-05-18 17:28:43
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amilie030312

金虫 (正式写手)

有没有可能你加样的时候习惯不太好,都不换枪头啊,带进来的DNA污染,空白对照有条带最大的可能就是试剂有污染了,但是如果所有试剂都换了还有那就是你们实验室被PCR的气溶胶给污染了,这个就比较麻烦了,需要用去除DNA的试剂把你们实验室的试验台啊,喷洒空气,反正就是去除你们实验室所有的DNA污染,不然你就是只用清水当模板跑也能跑出条带的。
6楼2009-05-18 17:31:20
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sutao1979

木虫 (著名写手)

小木虫10年groupleader

污染的最大可能就是空白对照的buffer里边混进了模板,所以,在所有的试剂(包括引物)换新的之后,操作一定要注意
会当凌绝顶,一览众山小
7楼2009-05-18 19:34:08
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j2

木虫 (正式写手)

可是LZ不是单独做空白就没问题吗,应该不是试剂污染啊~
真是高技术性难题~
观望
修炼ing,当虫仙……
8楼2009-05-19 13:30:38
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bbyu007

木虫 (正式写手)

我断言是loading buffer的问题
我是笨笨鱼~~~
9楼2009-05-19 13:46:27
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