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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » PCR的空白电泳跑出了条带
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相忘于江湖

新虫 (初入文坛)

[交流] PCR的空白电泳跑出了条带

请大家帮帮忙，PCR产物跑电泳的时候做的空白对照（就是没有加模版的，其他PCR所需试剂都加了的）总是跑出条带，我觉得是试剂污染，最后做试剂交叉试验，找出了是一种试剂污染了，最后换了新的，可是再做的时候还是有条带，我只好又只对空白PCR，跑电泳，结果没有条带，那说明新换的试剂没有污染，可是空白跟其样品一起做的时候又跑出了条带，但跟样品条带不在一个位置，请各位高手帮帮忙，到底是怎么回事啊，很着急，谢谢了！
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1楼 2009-05-18 11:18:51
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yoyocan

金虫 (正式写手)
你用的是不是 某些公司送的上样缓冲液的？ 可能是那个东西 坏掉了
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2楼2009-05-18 13:39:58
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lifefamily

呵呵~~
换水，换loading buffer
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3楼2009-05-18 17:06:21
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juke9910

铜虫 (初入文坛)
可能是胶有问题，也有可能跟操作相关吧
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4楼2009-05-18 17:24:38
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sunyi394

银虫 (小有名气)
呀,重大科研突破啊,快投稿nature
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5楼2009-05-18 17:28:43
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amilie030312

金虫 (正式写手)
有没有可能你加样的时候习惯不太好，都不换枪头啊，带进来的DNA污染，空白对照有条带最大的可能就是试剂有污染了，但是如果所有试剂都换了还有那就是你们实验室被PCR的气溶胶给污染了，这个就比较麻烦了，需要用去除DNA的试剂把你们实验室的试验台啊，喷洒空气，反正就是去除你们实验室所有的DNA污染，不然你就是只用清水当模板跑也能跑出条带的。
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6楼2009-05-18 17:31:20
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sutao1979

木虫 (著名写手)

小木虫10年groupleader
污染的最大可能就是空白对照的buffer里边混进了模板，所以，在所有的试剂（包括引物）换新的之后，操作一定要注意
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会当凌绝顶，一览众山小
7楼2009-05-18 19:34:08
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j2

木虫 (正式写手)
可是LZ不是单独做空白就没问题吗，应该不是试剂污染啊~
真是高技术性难题~
观望
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修炼ｉｎｇ，当虫仙……
8楼2009-05-19 13:30:38
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bbyu007

木虫 (正式写手)
我断言是loading buffer的问题
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我是笨笨鱼~~~
9楼2009-05-19 13:46:27
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