应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 调节蛋白液pH是否影响蛋白活性？
31/1返回列表
查看: 2301  |  回复: 2
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

未知时光

金虫 (小有名气)

[求助] 调节蛋白液pH是否影响蛋白活性？ 已有1人参与

是这样的，最近做一个蛋白激酶的体外表达，his标签，过柱洗脱后直接冻于-80°c，隔日拿出于冰上融化，发现液体浑浊，有蛋白析出，初步考虑是由于蛋白等电点与洗脱液ph相近导致蛋白析出，但是查了一下我的蛋白等电点5.9 而洗脱液8.0，差的也不小啊。但加NaoH调ph后确实能溶，请问能否通过调节ph使蛋白复溶，由于是激酶，不知调节ph是否影响蛋白性质和酶活性，请大家赐教~不胜感激！
回复此楼

» 猜你喜欢
我想起那天夕阳下的奔跑,那是我逝去的青春。
1楼 2019-04-15 10:47:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gaorj

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
未知时光: 金币+3, ★★★很有帮助 2019-04-16 09:58:27
蛋白溶液尽量不冻融，冷冻保存很容易对酶造成损伤，你这过一天就做还是放在4度更好。冻融导致的因素变化很复杂，由于缓冲剂不能均匀冻在冰里面，溶液局部pH会有变化，大部分时候酶再溶解后活力会有损失。除非是嗜热酶。以后最好一鼓作气做完。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2019-04-16 08:04:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

未知时光

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by gaorj at 2019-04-16 08:04:15
蛋白溶液尽量不冻融，冷冻保存很容易对酶造成损伤，你这过一天就做还是放在4度更好。冻融导致的因素变化很复杂，由于缓冲剂不能均匀冻在冰里面，溶液局部pH会有变化，大部分时候酶再溶解后活力会有损失。除非是嗜热 ...

好的好的，按你的意思我还是重新提一遍蛋白比较好
赞一下 回复此楼
我想起那天夕阳下的奔跑,那是我逝去的青春。
3楼2019-04-16 09:56:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 未知时光 的主题更新
31/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085600 材料与化工 295 求调剂 +8 dream…… 2026-03-10 8/400 2026-03-10 18:24 by ms629
[考研] 材料工程专硕，一志愿中国矿业大学，总分314，求调剂 +3 无懈可击的巨人 2026-03-10 3/150 2026-03-10 17:14 by 泡泡堂路飞
[考研] 0857环境调剂 +3 熠熠_11 2026-03-10 3/150 2026-03-10 15:54 by peike
[考研] 083000环境科学与工程调剂 +6 mingmingry 2026-03-09 7/350 2026-03-10 14:37 by kkkdtdde
[考研] 材料与化工求调剂 +11 与冬清宁 2026-03-07 14/700 2026-03-10 14:23 by Linda Hu
[考研] 复试调剂 +6 呼呼？~+123456 2026-03-08 8/400 2026-03-10 11:36 by 呼呼？~+123456
[考研] 085600材料与化工，一志愿广州985，求调剂 +15 qqyyaill 2026-03-05 15/750 2026-03-10 08:23 by Linda Hu
[考研] 310 070300化学求调剂 +4 扑风铃的猫 2026-03-08 5/250 2026-03-09 19:46 by 30660438
[考研] 一志愿南大化学339分求调剂，四六级已过，有比赛，有文章 +7 Gallantzhou 2026-03-07 7/350 2026-03-09 18:38 by 30660438
[考研] 290求调剂 +6 Bananaiy 2026-03-04 6/300 2026-03-08 22:13 by qingfeng258
[考研] 269求调剂 +3 朔朔话 2026-03-08 4/200 2026-03-08 20:39 by 热情沙漠
[考研] 288求调剂085600材料与化工 +13 Daunrin 2026-03-07 15/750 2026-03-08 19:10 by 加号+
[考研] 求调剂，一志愿华中科大0702，数一英一，293 +4 小罗露一二 2026-03-07 4/200 2026-03-08 16:36 by 星空星月
[考研] 材料科学（0805）338 求调剂 +7 xiaokang3286 2026-03-07 7/350 2026-03-08 03:42 by lfhuang
[考研] 化学290求调剂 +3 两颗 西柚 2026-03-07 4/200 2026-03-07 20:55 by macy2011
[考研] 0307化学求调剂 +6 0ok0k 2026-03-07 6/300 2026-03-07 20:10 by pies112
[考研] 诚求调剂，323分 有专利/科研/实习经历 +6 橙子cyx 2026-03-06 8/400 2026-03-07 19:06 by 新篇章DFSS
[考研] 化工282求调剂一志愿211 +5 NA0912 2026-03-05 6/300 2026-03-05 20:10 by 2735147993
[考研] 320材料一志愿西工大专硕英二数二 有两年光伏工作经验 +5 锤某人 2026-03-04 8/400 2026-03-05 09:24 by oxidpl
[考研] 307求调剂 +4 xuyuan111 2026-03-04 5/250 2026-03-04 20:39 by kakakapanpan
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭