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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 用大肠杆菌可以表达真核基因？
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ocbc

新虫 (小有名气)

[求助] 用大肠杆菌可以表达真核基因？ 已有1人参与

我看一些文献中，用大肠杆菌可以转真核基因，可以吗？什么情况可以这样呢？
真核基因（带有内含子，只有基因序列），一般该如果进行外源表达？
求教 谢谢了 ！
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1楼 2019-03-30 17:47:32
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pursuream

至尊木虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2019-03-30 23:01:13
ocbc(渊博震天代发): 金币+3, 鼓励积极回帖 2019-07-22 19:14:29
可以反转录成cDNA在构建啊，有cDNA文库这种东西的。而且就算没有，也可以直接合成基因。钱能解决的问题都不是问题。

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2楼2019-03-30 18:20:11
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ocbc

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by pursuream at 2019-03-30 18:20:11
可以反转录成cDNA在构建啊，有cDNA文库这种东西的。而且就算没有，也可以直接合成基因。钱能解决的问题都不是问题。

那我怎么由一条确定的基因 得到相应的cDNA呢？
我得到的信息是可以由基因设计引物，再在cDNA文库中去钓相应的cDNA，这种办法可行吗？
因为我一般理解引物就是根据本身设计，如果由含内含子的DNA设计引物，这个引物对其相应的cDNA适合吗？
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3楼2019-04-02 10:36:18
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匿名

用户注销 (正式写手)
本帖仅楼主可见
4楼2019-05-14 09:38:52
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Misterboy

铁虫 (正式写手)
★ ★
ocbc(渊博震天代发): 金币+2, 鼓励积极回帖 2019-07-22 19:14:57
先提RNA，在用逆转路酶，得到cDNA，在设计引物，得DNA，引物设计用去掉内含子的模版，一般真核基因不用大肠杆菌，异源表达，一般用A.nidulan或者yeast

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5楼2019-05-24 01:34:52
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bright8

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
ocbc: 金币+2 2019-07-19 09:51:43
提取RNA，反转录成CDNA，再以CDNA为模板，进行克隆，重组，表达即可。
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6楼2019-05-29 11:10:56
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