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ocbc

新虫 (小有名气)

[求助] 用大肠杆菌可以表达真核基因? 已有1人参与

我看一些文献中,用大肠杆菌可以转真核基因,可以吗?什么情况可以这样呢?
真核基因(带有内含子,只有基因序列),一般该如果进行外源表达?
求教 谢谢了 !
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pursuream

至尊木虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2019-03-30 23:01:13
ocbc(渊博震天代发): 金币+3, 鼓励积极回帖 2019-07-22 19:14:29
可以反转录成cDNA在构建啊,有cDNA文库这种东西的。而且就算没有,也可以直接合成基因。钱能解决的问题都不是问题。

发自小木虫Android客户端
2楼2019-03-30 18:20:11
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ocbc

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by pursuream at 2019-03-30 18:20:11
可以反转录成cDNA在构建啊,有cDNA文库这种东西的。而且就算没有,也可以直接合成基因。钱能解决的问题都不是问题。

那我怎么由一条确定的基因 得到相应的cDNA呢?
我得到的信息是可以由基因设计引物,再在cDNA文库中去钓相应的cDNA,这种办法可行吗?
因为我一般理解引物就是根据本身设计,如果由含内含子的DNA设计引物,这个引物对其相应的cDNA适合吗?
3楼2019-04-02 10:36:18
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匿名

用户注销 (正式写手)

本帖仅楼主可见
4楼2019-05-14 09:38:52
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Misterboy

铁虫 (正式写手)

★ ★
ocbc(渊博震天代发): 金币+2, 鼓励积极回帖 2019-07-22 19:14:57
先提RNA,在用逆转路酶,得到cDNA,在设计引物,得DNA,引物设计用去掉内含子的模版,一般真核基因不用大肠杆菌,异源表达,一般用A.nidulan或者yeast

发自小木虫IOS客户端
5楼2019-05-24 01:34:52
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bright8

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
ocbc: 金币+2 2019-07-19 09:51:43
提取RNA,反转录成CDNA,再以CDNA为模板,进行克隆,重组,表达即可。
6楼2019-05-29 11:10:56
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