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huier8517

金虫 (小有名气)

[交流] 求助载体构建

我想请教一下:我做转录调控荧光素酶报告基因系统时,需要将体外EMSA验证有结合的一段序列连至核心启动子,研究蛋白对其的直接调控作用,这段序列才19 bp。
我是用引物合成的方法先合成单链,两端加不同的酶切位点,然后再自己95度退火合成双链的。接着酶切胶回收与核心启动子相连。
请问我的做法恰当吗?因为我酶切鉴定时没看到切下来的小片段

请将具体步骤告知包括鉴定方法,多谢啦

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郭继波

荣誉版主 (文学泰斗)

神龍教梦家园的小百姓-波波

优秀版主优秀版主

呵呵 有点专业  帮忙顶啊 ,。。。。。。
菩提本无树,明镜亦非台。
2楼2009-05-14 21:54:06
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七夜魔君

金虫 (著名写手)

了解皮毛,本科,解决不了
蛀虫家族之魔头虎
3楼2009-05-15 09:07:33
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xinjia61224

铜虫 (初入文坛)

片段太小,你电泳的胶的浓度是多大啊
这么少的片段一般很难回收到
4楼2009-05-15 16:51:22
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