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wuliang23

金虫 (小有名气)

[求助] 大肠杆菌不表达外源蛋白已有1人参与

将目的基因导入bl21,发现目的蛋白未表达,或者是表达量很低。用的16摄氏度 0.4mMIPTG诱导。之前也试过不同浓度梯度0.1-0.4mMIPTG结果一样,sds无明显目的条带,wb无目的条带。测序表明启动子和序列都对,为什么还是有这种现象,求大神解答,郁闷死了

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555weiteng

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by tq0ax1r at 2019-03-30 11:18:39
如果是大肠杆菌表达真核细胞蛋白,除了用rosetta之外,同时还可以尝试用m9 minimum media。我就碰到过这种情况,rosetta在rich media里不表达,在minimum media里出现目的条带的。记得要保持低温表达

您好,目前我也是表达不出来蛋白,是否可以说下您的 rich media, minimum media,比较下培养基的区别。
5楼2019-05-13 09:16:46
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