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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 反复冻融----胞内产物
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laijianxuan

金虫 (正式写手)

[交流] 反复冻融----胞内产物

请教各位老师：
通过反复冷冻的方法，能否破坏细胞膜，从而得到细胞膜内的蛋白多肽产物？
有相关文献资料吗？

提供者重重有赏！

[ Last edited by laijianxuan on 2009-5-14 at 11:19 ]
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我自信！我成就！
1楼 2009-05-14 10:58:47
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baisuilan

金虫 (正式写手)
★
laijianxuan(金币+1,VIP+0):谢谢 5-20 10:20
我师兄用反复冻融法提取过包装细胞内的病毒颗粒。-80/37度反复快速冻融，应该是可以的。
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2楼2009-05-14 11:05:10
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yuhuimeiye

木虫 (著名写手)
★
laijianxuan(金币+1,VIP+0):谢谢指教 5-20 10:21
可以，将细胞在-80或液氮中冻，然后解冻，反复数次，裂解效果不错。
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3楼2009-05-14 11:35:44
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wuer413023

至尊木虫 (文坛精英)

没事领金币
★
laijianxuan(金币+1,VIP+0):谢谢指教 5-20 10:21
可以的


(1)冷热交替

冷热交替是在90℃左右维持数分钟，立即放入冰浴中使之冷却，如此反复多次，绝大部分细胞可以被破碎，细菌或病毒中提取蛋白质和核酸时可用此技术。

(2)反复冻融

反复冻融是将待破碎的细胞冷至－15℃~－20℃，然后放于室温(或40℃)迅速融化，如此反复冻融多次，由于细胞内形成冰粒使剩余胞液的盐浓度增高而引起细胞破碎。
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上邪!我欲与君相知，长命无绝衰。山无陵，江水为竭，冬雷震震，夏雨雪，天地合，乃敢与君绝！
4楼2009-05-14 12:11:08
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liuke009

铁杆木虫 (著名写手)
★
laijianxuan(金币+1,VIP+0):谢谢指教 5-20 10:21
细胞膜内蛋白单纯的反复冻融可能效果还是不太理想，一定要加入高浓度的表面活性剂，比如CHAPS啥的，这是关键，即使不反复冻融，较长时间的低温超声应该也可以
祝好运
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5楼2009-05-14 12:59:41
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ruijie1111

金虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★
laijianxuan(金币+5,VIP+0):这个太感谢了，多谢指教 5-20 10:22
laijianxuan(金币+1,VIP+0):多多交流！！！ 12-12 11:21
具体么，看是什么细胞了
原核，真核，动物、植物……
我们私下说咯。。。。。。。
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处处留情! 人生就是一场戏.
6楼2009-05-15 16:32:47
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laijianxuan

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by wuer413023 at 2009-5-14 12:11:
可以的


(1)冷热交替

冷热交替是在90℃左右维持数分钟，立即放入冰浴中使之冷却，如此反复多次，绝大部分细胞可以被破碎，细菌或病毒中提取蛋白质和核酸时可用此技术。

(2)反复冻融

反复冻融是将待破 ...

你这个方法会把我的蛋白质弄变性的。我感觉不可取。
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我自信！我成就！
7楼2009-05-15 16:37:07
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