24小时热门版块排行榜

返回列表

你是路人甲

铜虫 (小有名气)

应助: 1 (幼儿园)
金币: 232
帖子: 191
在线: 24.8小时
虫号: 13104654

[交流] 绝对定量pcr

想问一下绝对定量PCR使用荧光定量还是探针法？

回复此楼

» 猜你喜欢

2027博士申请-临床检验诊断学、病原生物学、微生物方向已经有5人回复
【长期招聘】复旦大学 AI 制药实验室博士后招聘已经有10人回复
各位基础老师们，看完中央《从严治党》的决定后，对学术界更加有信心了吧已经有4人回复
越来越担心硕士毕业后没有竞争力了已经有15人回复
申博自荐 2篇一区TOP+1篇EI+2公开发明专利 2027博士申请已经有3人回复

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴

1楼 2019-03-20 08:56:35

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

宇宙小妖怪

铁虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 335.2
帖子: 215
在线: 43.4小时
虫号: 13010065

探针法特异性较强，用TaqMan探针法做下来的实验数据会更为准确些，，但是也比较贵我们实验室后期计划用BIODA KITI检测目标DNA,探针法是在PCR扩增时，加入一对引物的同时再加入一个特异性的荧光探针。该探针为一直线型的寡核苷酸，两端分别标记一个荧光报告基团和一个荧光淬灭基团，探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收，PCR 仪检测不到荧光信号； PCR扩增时（在延伸阶段），Taq 酶的 5' － 3' 切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而荧光监测系统可接收到荧光信号，即每扩增一条 DNA 链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的累积与 PCR 产物形成完全同步，这也是定量的基础所在。

赞一下