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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 色谱柱问题，高手帮忙解决一下！
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wangxiujie

金虫 (小有名气)

[交流] 色谱柱问题，高手帮忙解决一下！

有两个关于色谱柱的问题请教一下大家
1. 岛津ODS反相色谱柱250mm*4.6mm，用乙腈-水 80-20 柱压正常0.2ml/min流速，柱压为2.3MPA，当用乙腈-水  50：50 时柱压高到离谱，0.2ml/min的流速柱压6.6MPA，首先仪器室没有问题的，想问一下是什么原因导致这个现象呢，还有就是这个柱子还能救活吗？

2. 菲罗门C18反相色谱柱250mm*4.6mm，进样是峰的前半部分像要出现分叉峰似的，以前没有这种现象，想请教一下有什么办法解决这个问题吗？
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1楼 2009-05-13 15:53:58
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shitou0307

木虫 (正式写手)
★
clkk216(金币+1,VIP+0):谢谢参与虫友讨论~~ 5-13 17:34
/第一个问题：先用纯乙腈或者甲醇冲10h以上在看吧，不行再与不同浓度的的水梯度冲洗
第二个问题：你的标准品稳定么？有没有手性？一般这样的问题都会出现在样品的处理上
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2楼2009-05-13 16:54:35
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pal2004

木虫 (正式写手)
★
karl2100(金币+1,VIP+0):多谢指教！ 5-13 19:06
1. 水的比例增加，柱压肯定上升，至于这么离谱，看看你的水滤干净没有，走水的道里是不是不干净，用乙腈走一会儿柱压会不会降下来。
2. 如果样品没问题，有可能是柱效不行了，换根柱子试试吧，我感觉菲罗门的柱子不是很耐用。
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3楼2009-05-13 17:36:02
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zsqycxy

至尊木虫 (著名写手)
★
clkk216(金币+1,VIP+0):谢谢参与虫友讨论~~ 5-13 21:12
水的比例增大，柱压很定上升啊，当两者比例相当时柱压是最高的
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4楼2009-05-13 19:43:26
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zinedine

新虫 (正式写手)
★
karl2100(金币+1,VIP+0):多谢指教！ 5-14 00:10
1.应该是水的比例太大了，C18 的柱子，随着流动相含水比例的增加，他对固定相的润湿作用减弱，类似于堵塞了柱子。水的比例增高后柱压会升高，以后过反相柱最好别用含水比例这么高的流动相吧。
2.可能是你的柱子坏了，柱子里出现了断层或塌陷，如果真是这样可以找人再添装一下。
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5楼2009-05-14 00:06:36
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无双国士

至尊木虫 (著名写手)
★
xy4585618(金币+1,VIP+0):3q 5-14 14:37
1、乙腈和水混合时液体的粘度变化而导致压力变化。建议用水冲洗1小时左右，再用甲醇冲洗1小时。
2、首先考虑你的色谱柱是否塌方，然后考虑你的样品是否稳定，再者请确认你的流动相配制是否准确。
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拔毛的凤凰真的不如个鸡吧？
6楼2009-05-14 08:00:12
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wangxiujie

金虫 (小有名气)
谢谢大家的回复！
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7楼2009-05-16 11:27:38
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