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czbd2016

铜虫 (小有名气)


[交流] 实时定量PCR的结果分析

实时定量PCR的结果如何分析?师兄说最好不用Syber Green,是什么原因?
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铜虫 (小有名气)


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西门吹雪170: 金币+3, 鼓励回帖交流 2019-03-18 21:03:24
Sybergreen可以和所有核酸结合,没有特异性。所以要保证特异性的话,最好用其他的方法。扩增体系中加入模板DNA的体积,比如同时10微升的体系,对照组加1微升DNA,实验组加2微升DNA,则实验组的加样量是对照组的2倍。看CT值是分析荧光定量PCR最直观的一个数据,CT值一般在35左右就失去参考价值了,平时我们实验室用BIODAI-PCR荧光定量法测得的扩增曲线的起跳值基本在30左右
3楼2019-03-18 17:29:03
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