24小时热门版块排行榜    

查看: 902  |  回复: 6
当前主题已经存档。

lidannytc

铁虫 (初入文坛)

[交流] 蓝白斑筛选菌落只长在培养基边缘

为什么我涂板后菌落只在培养基边缘生长?我用的是蓝白斑筛选,涂了IPTG和X-Gal的都是只在板子边缘稀稀拉拉长几个菌,不用IPTG和X-Gal,只是Amp筛选的话板子长得满满的很均匀,我重新换了IPTG和X-Gal还是出现同样的问题,不知道怎么回事?难道诱导后产生了毒性蛋白?我那么多不同的连接产物不会都产生毒性蛋白吧?真是郁闷,有哪位同仁之前也遇到过同样的问题帮忙解答一下吧?

[ Last edited by 350784478 on 2009-9-19 at 12:55 ]
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

snzydong

铁杆木虫 (著名写手)

你可以不用蓝白筛选 只用AMP筛选 然后做个菌液PCR鉴定 插入大小对就可以了
对于蓝白筛这种转化问题 不用了解那么清楚 只要有插入片段 快往下作就对了
2楼2009-05-13 16:46:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ZhX820423

木虫 (正式写手)

我最近做蓝白斑筛选也遇到这种情况,等待大神解疑
3楼2009-05-14 09:58:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷

我一般都不用蓝白斑筛选,菌液pcr或是提质粒跑个对照电泳再做个酶切,节约了X-Gal,而且也不怕出假阳性。
Thank-you,so-blue.
4楼2009-05-14 12:30:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

大海一孤舟

铜虫 (小有名气)

首先我看到楼主提到表达毒性蛋白的问题,据我所知蓝白斑筛选采取的是插入失活的原理,不会有目的表达。
    蓝白斑筛选用的是一个很固定的菌株,不知道你用的是什么菌株。
5楼2009-05-14 12:48:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

adazalea

金虫 (正式写手)

居然有这种事情出现?
我做的蓝白斑筛选表现还不错,就是测序结果让我郁闷的不行!!
朋友是悠闲时最想喝的那杯清茶。
6楼2009-05-24 10:18:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bioinfuture

铁虫 (小有名气)

疑惑呀,这是什么原因呢
7楼2009-05-25 22:27:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 lidannytc 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +32 医学老男孩 2026-08-13 74/3700 2026-08-16 21:05 by 医学老男孩
[基金申请] 2027广东省杰青 +3 奶牛小黑 2026-08-15 6/300 2026-08-16 20:07 by 奶牛小黑
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +10 majunge000 2026-08-11 12/600 2026-08-16 08:18 by xli1984
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +6 wangze12014 2026-08-14 7/350 2026-08-15 20:12 by gltch
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +8 布布和一二 2026-08-10 11/550 2026-08-14 14:58 by Equinoxhua
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[基金申请] FileCode能看出啥? +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
信息提示
请填处理意见