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新虫 (小有名气)

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专业: 细胞生理学

[交流] DNA聚合酶

各位，我需要做基因的序列测定检测突变，目的片断大小374bp,由于目的片断不是很大,现在在犹豫是用高保真的DNA聚合酶还是用普通的TAQ酶,大家给个意见,谢谢！

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投稿Elsevier的杂志（返修），总是在选择OA和subscription界面被踢皮球已经有8人回复

1楼 2019-03-06 15:47:01

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

吃瓜的半仙

新虫 (小有名气)

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专业: 生物化学

你应该用高保真的DNA聚合酶，尤其是你做的是检测突变的实验，如果用普通的TAQ酶，扩增的片断很容易引起突变，我曾经用普通的TAQ酶后导致我的目的片断发生突变，换用BIODAI高保真的DNA聚合酶后没问题。因为高保真的DNA聚合酶具有5‘-3’DNA聚合酶的活性和3‘-5’的外切酶活性，能纠正DNA扩增过程中产生的碱基错配。它主要用于基因表达克隆、基因定点突变、细胞内基因点突变的分析和末端补平等实验中。