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渣渣康

新虫 (初入文坛)

[交流] 蒽酮比色法测定蛋白植物存在的问题 已有3人参与

测定甘蔗和桑叶的可溶性碳水化合物(WSC),多次测量结果桑叶的WSC高于甘蔗,是否是蛋白的影响,接下来应该怎么改善测定方案。附上测定方案:

试剂与标准曲线制作:
蒽酮试剂:称取0.4g蔥酮溶于100mL88%硫酸中(现配现用)。
① 葡萄糖标准溶液:称取200g葡萄糖溶于1000mL的容量瓶中,配制成200ug/mL的标准溶液;
② 取6支干燥洁净的试管(EP管15mL以上),在试管中分别加入0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mL上述标准溶液,再分别添加1.0、0.9、0.8、0.7、0.6、0.5mL蒸馏水;对应葡萄糖浓度分别为0、20、40、60、80、100ug/mL。
③分别添加蒽酮试剂5mL,于沸水浴中煮沸10min,取出冷却,然后在620nm波长处测定OD值,制作标准曲线(拟合度R2 > 0.99);
?样品含量的测定:
①称取粉碎的样品0.2g置于试管中,加10mL蒸馏水,沸水浴30分钟,离心获得提取液,再稀释100倍待测;
②取1mL稀释过后的提取液,加入试管中,加蒽酮试剂5mL,于沸水浴中煮沸10min,取出冷却,然后在620nm波长处测定OD值;
③根据糖标准曲线计算样品中的糖含量。
结果计算:WSC=C×100÷10-6×10÷0.2×100%
式中: C:从标准曲线查询的浓度(ug/mL);100:稀释倍数;10-6:ug换算成g;10:样品水浴体积;0.2:干物质样

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渣渣康

新虫 (初入文坛)

2楼2019-03-09 17:01:23
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菲菲菲鱼

新虫 (小有名气)



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亲,找到原因了吗?
3楼2019-03-13 09:52:57
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愤怒的小祥

银虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我也出现了这种情况

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4楼2020-02-23 19:38:29
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食品灬戴子龙

铜虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
是不是考虑除蛋白质啊,色素和含色氨酸的蛋白质对蒽酮比色法测可溶性糖又干扰的。有文献讲,待测液含白蛋白和球蛋白时,与待测液只含果糖相比,显色变浅。

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5楼2020-09-11 11:01:42
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