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蒽酮比色法测定蛋白植物存在的问题 已有3人参与
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测定甘蔗和桑叶的可溶性碳水化合物（WSC），多次测量结果桑叶的WSC高于甘蔗，是否是蛋白的影响，接下来应该怎么改善测定方案。附上测定方案： 试剂与标准曲线制作： 蒽酮试剂:称取0.4g蔥酮溶于100mL88%硫酸中（现配现用）。 ① 葡萄糖标准溶液:称取200g葡萄糖溶于1000mL的容量瓶中，配制成200ug/mL的标准溶液； ② 取6支干燥洁净的试管（EP管15mL以上），在试管中分别加入0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mL上述标准溶液，再分别添加1.0、0.9、0.8、0.7、0.6、0.5mL蒸馏水；对应葡萄糖浓度分别为0、20、40、60、80、100ug/mL。 ③分别添加蒽酮试剂5mL,于沸水浴中煮沸10min,取出冷却，然后在620nm波长处测定OD值，制作标准曲线（拟合度R2 > 0.99）； ?样品含量的测定: ①称取粉碎的样品0.2g置于试管中，加10mL蒸馏水，沸水浴30分钟，离心获得提取液，再稀释100倍待测； ②取1mL稀释过后的提取液，加入试管中，加蒽酮试剂5mL,于沸水浴中煮沸10min,取出冷却，然后在620nm波长处测定OD值； ③根据糖标准曲线计算样品中的糖含量。 结果计算：WSC=C×100÷10-6×10÷0.2×100% 式中： C：从标准曲线查询的浓度（ug/mL）；100：稀释倍数；10-6：ug换算成g；10：样品水浴体积；0.2：干物质样 发自小木虫IOS客户端 |
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
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是不是考虑除蛋白质啊，色素和含色氨酸的蛋白质对蒽酮比色法测可溶性糖又干扰的。有文献讲，待测液含白蛋白和球蛋白时，与待测液只含果糖相比，显色变浅。 发自小木虫Android客户端 |
5楼2020-09-11 11:01:42
