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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 干扰/敲除 » Jurkat细胞转染问题
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czbd2016

铜虫 (小有名气)

[求助] Jurkat细胞转染问题 已有2人参与

前段时间用脂质体转染了Jurkat细胞，但是转染后15小时，发现大批单个细胞出现膨胀、变形，成簇的细胞变化倒不是很明显。却在转染后36h发现大批单个细胞死亡，而且转染效率特别低，只有1%左右，是什么原因？
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1楼 2019-03-05 08:46:28
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lirol

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

没有做过悬浮细胞的转染，但是Jurkat细胞经常养，成簇的一般是状态不太好，不知道您在转染前是否测了细胞成活率。
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3楼2019-04-12 14:20:58
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你是路人甲

铜虫 (小有名气)
应该是试剂的毒性较大，楼主有没有在转染后4-6h及时更换培养液？我们实验室用24孔板做的，2 μl DeofectEU  对应1μg /1μl plasmid ，你的脂质体用量是多少？如何是严格按照说明书做的，我觉得可以略微减少用量
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2楼2019-03-05 17:20:46
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genemail

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

细胞死亡是以为转染试剂毒性太大，悬浮细胞转染和贴壁细胞的方法是不一样的
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4楼2020-06-07 14:17:16
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