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cxkhhh

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[交流] 细菌核酸提取

在提取细菌基因组DNA时发现，提基因组DNA的KIT没有特别说明排除质粒DNA的干扰啊，那是不是就意味着，提取的细菌基因组DNA里面也含有少量的质粒DNA呢？如果不是，那质粒DNA又是怎么排除的呢？请路过的各位大神指点一二！

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1楼2019-02-28 14:57:30

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别踩我的菜

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一般不会有质粒dna，我们去采样分离微生物培养biodai提基因组dna，都没有质粒污染。只要不是提含高拷贝质粒的工程菌的基因组应该都没有问题。即使真存在质粒污染，依然可以使用琼脂糖电泳纯化，切胶回收方式去除。

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2楼2019-03-08 16:23:56

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宇宙小妖怪

铁虫 (小有名气)

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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖

应该不会，对于革兰氏阴性菌和一般的革兰氏阳性菌，加入200μL BIOG裂解液Ⅰ，悬浮沉淀，37℃放置30分钟；对于细菌壁较厚的革兰氏阳性菌、真菌、细菌芽孢等须首先自行进行破壁处理（建议客户自备Sigma溶菌酶破壁），处理结束后加入200μL BIO裂解液Ⅱ，20μL消化液，充分振荡混匀，56℃水浴10 分钟。

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3楼2020-01-17 10:33:12

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