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cxkhhh

新虫 (小有名气)

[交流] 细菌核酸提取

在提取细菌基因组DNA时发现,提基因组DNA的KIT没有特别说明排除质粒DNA的干扰啊,那是不是就意味着,提取的细菌基因组DNA里面也含有少量的质粒DNA呢?如果不是,那质粒DNA又是怎么排除的呢?请路过的各位大神指点一二!
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别踩我的菜

新虫 (小有名气)

一般不会有质粒dna,我们去采样分离微生物培养biodai提基因组dna,都没有质粒污染。只要不是提含高拷贝质粒的工程菌的基因组应该都没有问题。即使真存在质粒污染,依然可以使用琼脂糖电泳纯化,切胶回收方式去除。
2楼2019-03-08 16:23:56
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宇宙小妖怪

铁虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
应该不会,对于革兰氏阴性菌和一般的革兰氏阳性菌,加入200μL BIOG裂解液Ⅰ,悬浮沉淀,37℃放置30分钟;对于细菌壁较厚的革兰氏阳性菌、真菌、细菌芽孢等须首先自行进行破壁处理(建议客户自备Sigma溶菌酶破壁),处理结束后加入200μL BIO裂解液Ⅱ,20μL消化液,充分振荡混匀,56℃水浴10 分钟。
3楼2020-01-17 10:33:12
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