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求大神指导96孔板做抑菌实验MIC测定的使用规范 已有4人参与
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96孔板做抑菌实验mic测定的使用规范,用完怎么灭菌?为什么每次测的od值不稳定是什么原因 发自小木虫Android客户端 [ Last edited by 小冀- on 2019-2-26 at 10:47 ] |
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请问用TTC怎么弄呀,我最近也用TTC做的,但是结果很奇奇怪怪,和理论结果相反,如果您有时间,麻烦您帮忙分析一下,谢谢! 请问有个问题需要请教,就是用96孔板测定药物的mic,药物是苯扎氯铵,用DMSO溶解的,药物浓度从左至右是依次减小的,然后用了TTC作为了显色剂,后两排显色的是DMSO组和阳性对照组(肉汤和菌液),他们两组显色了,最后还测定了每组的od值,有几个奇怪的现象,1. 就是od显示的是药物浓度大的反而长菌了,od值反而大,肉眼也可以看见有菌的生长,从左至右的od却依次减小,且接近于阴性对照组(只有肉汤培养基和显色剂),正常来讲应该是od值依次增大,因为随着药物浓度的减小,抑制菌的能力也相对减弱。2.第二点奇怪的是,除了阳性对照组和dmso组显色了,其余的都没有显色,实验的结果是,第一组药物长菌了,但是没显色。显色剂的原理是,检测机制在于TTC本身可作为一种氧化还原指示剂,活细胞内的脱氢酶(尤其是线粒体内的琥珀酸脱氢酶)可以将TTC还原为红色甲臢化合物TPF(1,3,5-triphenylformazan)。对于种子或者植物组织来说,染色结果为活组织被染成不同程度的红色,死组织或者无生命力的组织不着色。对于缺血梗塞组织,因组织坏死脱氢酶活力丧失呈现苍白色,而正常组织呈深红色。TTC常用的染色浓度为2%(w/v)(货号:AG3005),也可根据组织类型做浓度的适当调整。就是明明阳性对照组都显色了,加入药物的为什么不显色。求大神指点!!!! |
5楼2022-07-19 12:08:48













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