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求大神指导96孔板做抑菌实验MIC测定的使用规范 已有4人参与
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96孔板做抑菌实验mic测定的使用规范，用完怎么灭菌？为什么每次测的od值不稳定是什么原因 发自小木虫Android客户端 [ Last edited by 小冀- on 2019-2-26 at 10:47 ] |
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请问用TTC怎么弄呀，我最近也用TTC做的，但是结果很奇奇怪怪，和理论结果相反，如果您有时间，麻烦您帮忙分析一下，谢谢！ 请问有个问题需要请教，就是用96孔板测定药物的mic，药物是苯扎氯铵，用DMSO溶解的，药物浓度从左至右是依次减小的，然后用了TTC作为了显色剂，后两排显色的是DMSO组和阳性对照组（肉汤和菌液），他们两组显色了，最后还测定了每组的od值，有几个奇怪的现象，1. 就是od显示的是药物浓度大的反而长菌了，od值反而大，肉眼也可以看见有菌的生长，从左至右的od却依次减小，且接近于阴性对照组（只有肉汤培养基和显色剂），正常来讲应该是od值依次增大，因为随着药物浓度的减小，抑制菌的能力也相对减弱。2.第二点奇怪的是，除了阳性对照组和dmso组显色了，其余的都没有显色，实验的结果是，第一组药物长菌了，但是没显色。显色剂的原理是，检测机制在于TTC本身可作为一种氧化还原指示剂，活细胞内的脱氢酶（尤其是线粒体内的琥珀酸脱氢酶）可以将TTC还原为红色甲臢化合物TPF（1,3,5-triphenylformazan）。对于种子或者植物组织来说，染色结果为活组织被染成不同程度的红色，死组织或者无生命力的组织不着色。对于缺血梗塞组织，因组织坏死脱氢酶活力丧失呈现苍白色，而正常组织呈深红色。TTC常用的染色浓度为2%（w/v）(货号：AG3005)，也可根据组织类型做浓度的适当调整。就是明明阳性对照组都显色了，加入药物的为什么不显色。求大神指点！！！！ |
5楼2022-07-19 12:08:48