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王雨云

金虫 (小有名气)

[交流] OD值测定的问题

分光光度计测定的值一般在0.2~0.8之间比较准确,我不稀释时测出来有1.2431,稀释2被就只有0.2222了,稀释1.5被又有0.7563了,怎么解释呢?

   有没有人做过细菌的生长曲线,想问一哈一般什么时候开始测OD值,时间间隔的设定各位都有什么经验,分享一下,谢谢!
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寰宇123

金虫 (正式写手)

数据误差可能是不均匀造成的,包括稀释前不均匀。
另外,不知道你的试验策略,因此没法准确回答测量时间。
有种是定时测,有种是全做完同时测。
2楼2009-05-07 16:30:37
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无效神

金虫 (小有名气)

除去分光光度计的问题外,最有可能的就是混合不均匀
无所谓
3楼2009-05-07 17:37:21
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jqq1985

银虫 (正式写手)

这种情况很常见,同一点多测几组,不要怕麻烦。
什么时候测,怎样测得看你要干什么以及你的菌种的代时,我测生长曲线是每小时取一次(我的菌代时是1.5h),因为我还要测其他的生理指标所以,OD0.5以后就半个小时取一次。

[ Last edited by jqq1985 on 2009-5-7 at 18:40 ]
4楼2009-05-07 18:37:31
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王雨云

金虫 (小有名气)

楼上的所说很受用,我做的是产纤维素酶的芽孢杆菌,我自己是每天测一次,因为我的菌株的酶活一般是培养5天后才达到最高值,别的文章一般都是摇床培养4到5天才开始测酶活,还没看到文章做生长曲线,别人一般都不做这个,或者做了文章里根本不说,也许就是写文章一般还保留一些东西吧!
5楼2009-05-07 19:43:14
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su3

银虫 (小有名气)

做生长曲线测od需要稀释吗?如果不匀测之前振荡一下吧
6楼2009-05-07 20:22:20
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cauzhangtao

木虫 (正式写手)

以下问题
1,样品稀释不均匀,
2,分光光度计基础值偏移。校准使用
3,比色杯不干净
4,多稀释几个梯度。
7楼2009-05-07 20:59:09
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王雨云

金虫 (小有名气)

测得的结果在0.2~0.8之外就需要稀释。振荡不匀,反正感觉误差特别大,就像3楼说的多测几次,要不怕麻烦,有时工作量大了就觉得很麻烦,每次测还要估计大概稀释多少倍,麻烦啦!
8楼2009-05-07 21:01:06
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王雨云

金虫 (小有名气)

测得的结果在0.2~0.8之外就需要稀释。振荡不匀,反正感觉误差特别大,就像3楼说的多测几次,要不怕麻烦,有时工作量大了就觉得很麻烦,每次测还要估计大概稀释多少倍,麻烦啦!

[ Last edited by 王雨云 on 2009-5-7 at 21:05 ]
9楼2009-05-07 21:02:57
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王雨云

金虫 (小有名气)

6楼说的情况是比较普遍存在的问题,总的来讲我觉得通过分光光度计测OD值确实难以控制好,需要耐心摸索才能测到较理想的数据,谢谢各位啦!
10楼2009-05-08 08:37:05
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