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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » OD值测定的问题
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王雨云

金虫 (小有名气)

[交流] OD值测定的问题

分光光度计测定的值一般在0.2~0.8之间比较准确，我不稀释时测出来有1.2431，稀释2被就只有0.2222了，稀释1.5被又有0.7563了，怎么解释呢？

   有没有人做过细菌的生长曲线，想问一哈一般什么时候开始测OD值，时间间隔的设定各位都有什么经验，分享一下，谢谢！
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1楼 2009-05-07 16:04:43
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寰宇123

金虫 (正式写手)
数据误差可能是不均匀造成的，包括稀释前不均匀。
另外，不知道你的试验策略，因此没法准确回答测量时间。
有种是定时测，有种是全做完同时测。
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2楼2009-05-07 16:30:37
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无效神

金虫 (小有名气)
除去分光光度计的问题外，最有可能的就是混合不均匀
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无所谓
3楼2009-05-07 17:37:21
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jqq1985

银虫 (正式写手)
这种情况很常见，同一点多测几组，不要怕麻烦。
什么时候测，怎样测得看你要干什么以及你的菌种的代时，我测生长曲线是每小时取一次（我的菌代时是1.5h），因为我还要测其他的生理指标所以，OD0.5以后就半个小时取一次。

[ Last edited by jqq1985 on 2009-5-7 at 18:40 ]
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4楼2009-05-07 18:37:31
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王雨云

金虫 (小有名气)
楼上的所说很受用，我做的是产纤维素酶的芽孢杆菌，我自己是每天测一次，因为我的菌株的酶活一般是培养5天后才达到最高值，别的文章一般都是摇床培养4到5天才开始测酶活，还没看到文章做生长曲线，别人一般都不做这个，或者做了文章里根本不说，也许就是写文章一般还保留一些东西吧！
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5楼2009-05-07 19:43:14
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su3

银虫 (小有名气)
做生长曲线测od需要稀释吗？如果不匀测之前振荡一下吧
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6楼2009-05-07 20:22:20
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cauzhangtao

木虫 (正式写手)
以下问题
1，样品稀释不均匀，
2，分光光度计基础值偏移。校准使用
3，比色杯不干净
4，多稀释几个梯度。
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7楼2009-05-07 20:59:09
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王雨云

金虫 (小有名气)
测得的结果在0.2~0.8之外就需要稀释。振荡不匀，反正感觉误差特别大，就像3楼说的多测几次，要不怕麻烦，有时工作量大了就觉得很麻烦，每次测还要估计大概稀释多少倍，麻烦啦！
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8楼2009-05-07 21:01:06
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王雨云

金虫 (小有名气)
测得的结果在0.2~0.8之外就需要稀释。振荡不匀，反正感觉误差特别大，就像3楼说的多测几次，要不怕麻烦，有时工作量大了就觉得很麻烦，每次测还要估计大概稀释多少倍，麻烦啦！

[ Last edited by 王雨云 on 2009-5-7 at 21:05 ]
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9楼2009-05-07 21:02:57
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王雨云

金虫 (小有名气)
6楼说的情况是比较普遍存在的问题，总的来讲我觉得通过分光光度计测OD值确实难以控制好，需要耐心摸索才能测到较理想的数据，谢谢各位啦！
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10楼2009-05-08 08:37:05
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