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czbd2016

铜虫 (小有名气)

[求助] 关于原代内皮细胞的转染问题 已有1人参与

刚开始做原代内皮细胞转染,阳性对照也没有变化,大多情况下都敲低不下来,不知道可能的原因是什么?我应该在哪些条件上摸索,想请教大家lip2000的量一般都加多少呢?
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芳荷恋雨

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
转过几个原代细胞,效率都特别低,
一般可调的条件是转染的时间,转染试剂与质粒或者RNA的比例,细胞的量等方面调控,在细胞不死的情况下,降低细胞密度,延长转染时间,加大转染试剂的量。
上病毒靠谱一点
自己选的路,爬也要爬完
2楼2019-02-14 16:59:26
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你是路人甲

铜虫 (小有名气)

我看有些厂家说明书siRNA一般加50-100nM的比较多吧,不过也有加200-300nM。目前还在筛选转染试剂,有人给我推荐RFECT,说可以申请试用装,楼主用过吗?如果用过,给点建议。
3楼2019-02-14 17:19:54
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