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铜虫 (小有名气)

[求助] 关于原代内皮细胞的转染问题已有1人参与

刚开始做原代内皮细胞转染，阳性对照也没有变化，大多情况下都敲低不下来，不知道可能的原因是什么？我应该在哪些条件上摸索，想请教大家lip2000的量一般都加多少呢？

1楼 2019-02-14 08:48:46

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铜虫 (小有名气)

感谢参与，应助指数 +1

转过几个原代细胞，效率都特别低，
一般可调的条件是转染的时间，转染试剂与质粒或者RNA的比例，细胞的量等方面调控，在细胞不死的情况下，降低细胞密度，延长转染时间，加大转染试剂的量。
上病毒靠谱一点

自己选的路，爬也要爬完

2楼2019-02-14 16:59:26

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铜虫 (小有名气)

我看有些厂家说明书siRNA一般加50-100nM的比较多吧，不过也有加200-300nM。目前还在筛选转染试剂，有人给我推荐RFECT，说可以申请试用装，楼主用过吗？如果用过，给点建议。

3楼2019-02-14 17:19:54

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