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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 关于原代内皮细胞的转染问题
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czbd2016

铜虫 (小有名气)

[求助] 关于原代内皮细胞的转染问题 已有1人参与

刚开始做原代内皮细胞转染，阳性对照也没有变化，大多情况下都敲低不下来，不知道可能的原因是什么？我应该在哪些条件上摸索，想请教大家lip2000的量一般都加多少呢？
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1楼 2019-02-14 08:48:46
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芳荷恋雨

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
转过几个原代细胞，效率都特别低，
一般可调的条件是转染的时间，转染试剂与质粒或者RNA的比例，细胞的量等方面调控，在细胞不死的情况下，降低细胞密度，延长转染时间，加大转染试剂的量。
上病毒靠谱一点
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自己选的路，爬也要爬完
2楼2019-02-14 16:59:26
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你是路人甲

铜虫 (小有名气)
我看有些厂家说明书siRNA一般加50-100nM的比较多吧，不过也有加200-300nM。目前还在筛选转染试剂，有人给我推荐RFECT，说可以申请试用装，楼主用过吗？如果用过，给点建议。
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3楼2019-02-14 17:19:54
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