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吃瓜的半仙

新虫 (小有名气)

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[交流] 提取粪便中的细菌基因组DNA

我最近在提取粪便中的细菌基因组DNA，用试剂盒抽提DNA是成功了，可是做PCR扩增16rDNA，一直没有结果。看了一些资料说粪便中有大量的PCR抑制物，有什么办法可以去除吗？我已经提了很多样本了，所以最好能后期处理，就是把提好的DNA处理一下以去除抑制物，或者是尽量提高PCR的效率。

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1楼 2019-02-13 11:40:24

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别踩我的菜

新虫 (小有名气)

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将 DNA 凝胶电泳，再切胶回收，应该能去除其他抑制因子。我就是用这种方法除掉的。而且PCR没有结果建议做阳性对照，看看PCR体系有没有问题。你可以试试用PCR产物为模板再进行一轮PCR ，做PCR扩增可以使用BIODAI，因为你提的是总DNA,有可能有效模板浓度低，扩增产物量少检测不出来，放大就好了。